AI洞察

在培养细胞时有几点需要牢记，并且将一些简单的实践方法融入您的细胞培养过程可确保您获得可靠且一致的结果。这包括从了解如何选择培养基，到实施验证细胞系的程序。

培养基是稳定性的关键

您培养细胞所用的培养基可以说是培养成功的关键组成部分。有三种主要类型的培养基；基础培养基、低血清培养基和无血清培养基，每种的最佳实践略有不同。然而，为获得最佳性能需要注意的常见事项包括：保持正确的pH值，避免反复冻融（基础培养基不需要冷冻，最好冷藏），保护培养基免受光照，并尽量缩短在37°C下的加热时间。所有这些因素都可能影响培养基中化合物的稳定性，进而降低培养质量。

储存解决方案

您很可能在某个时候需要保存细胞以备将来使用。由于细胞极其脆弱且对环境变化敏感，因此在细胞的冻融过程中，确保您有一个经过验证的方案至关重要。使用含冷冻保护剂的冷冻保存培养基冷冻细胞并分装成小份以避免反复冻融——这可能会对细胞活力产生不利影响并造成细胞损伤。冻融的速度也至关重要。这可能因细胞类型而异，但一个好的经验法则是以每分钟1°C的速度冷冻，让细胞在冷冻时缓慢排出水分。解冻时，请确保将细胞放入预热的培养基中，使其迅速适应环境。

别忘了验证

惊人的20-30%的细胞系存在某种形式的交叉污染。因此，对您的细胞系进行验证测试以确认其身份并确保其不含污染物至关重要。有几种不同的验证方法：您可以选择简单地检查细胞形态在显微镜下观察是否存在不一致，或者进行更深入的分析，例如生长曲线、染色体或物种特异性线粒体DNA检测。如果您正在使用人类细胞系，短串联重复序列 (STR) 分析特别有用，因为您可以使用现有数据库来确定细胞的身份。

尽管细胞培养有许多方面需要考虑，但花时间了解并选择最适合您细胞培养过程的方法，将使您确信您的细胞能为成功的科学发现提供 基础。

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